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貨號 | 名稱 | 規格 |
6111021 | SuperCulture® L500淋巴細胞無血清培養基 Serum-Free Medium for Lymphocyte | 1000mL |
將 SuperCulture® L500 淋巴細胞無血清培養基放置室溫平衡。以下均為無菌操作:
無菌分離人外周血淋巴細胞(建議使用達優人淋巴細胞分離管/分離液,
使用 SuperCulture® L500 淋巴細胞無血清培養基將分離獲得的 PBMCs 按2~2.5×10 6個/mL 的濃度接種于 T75 或 T175 細胞培養瓶中,加入重組人 IFN-γ 等(建議使用達優 CIK 細胞因子套裝,Cat#:6141011),37℃,5%CO2 培養箱中培養。
24hr 后,即第 1 天加入 CD3 單抗、重組人 IL-2 等,刺激 CIK 細胞的生長和增殖。
從第 4 天開始,每兩天取樣計數細胞濃度并根據計數結果補充新鮮的SuperCulture® L500 淋巴細胞無血清培養(含 1000U/mL 的重組人 IL-2),調整細胞濃度為 1.5×10 6 個/mL。
第 7 天左右,根據細胞培養懸液體積選擇擴瓶或轉入細胞培養袋,T75 培養瓶最大培養體積 40mL,T175 培養瓶最大培養體積 200mL,當培養基體積超過 200mL 時,可轉入細胞培養袋中培養。
細胞增殖和細胞表面標志物檢測。
保存方法:
2℃~8℃,避光保存,保持無菌,保質期 12 個月。